達學堂·答疑討論
Q:請問手工制作原位雜交EBV和HPV片,出現背景是什么原因,怎樣避免該情況發生?
答:背景染色發生的原因絕大多數是組織前處理存在問題所致,包括固定不及時,固定時間不足等,所以首先要解決組織前處理問題。操作過程中可能由于雜交時間長或溫度高所致。如果是北京中杉金橋的試劑盒,可嘗試室溫雜交過夜(EBERS)
Q:基層醫院免疫組化陽性對照怎么做更加好?因為項目少,然后一個指標對應一個還是芯片陽性對照。
答:可以做成小型組織芯片蠟塊(包涵多種不同的組織,根據抗體表達譜自己設計)作為外對照,可同時做多個抗體的外對照。
Q:冰凍塊能做組化嗎?看書上寫了冰晶會影響抗原定位。
答:這位老師問的是做過冰凍的組織塊能否做免疫組化?還是冰凍切片能否做免疫組化?兩種均可做免疫組化。
Q:全自動機器,新試劑來了,加入機器的瓶子,如果里面還有沒用完的,把新的加進去有影響嗎?
答:會有影響,尤其是使用時間較長的抗體,添加新抗體前,盡量將原有的抗體先用完。
Q:請問腎臟igg抗體如何去背景?
答:請問這位老師問的是免疫熒光?還是免疫組化?如果是免疫熒光,將抗體再稀釋,縮短抗體孵育時間。如果是免疫組化,可嘗試改用低PH修復液修復,將抗體再稀釋,縮短抗體孵育時間等進行調整,但必須先用陽性對照組織進行測試,測試結果滿意后才能用于常規檢測。
Q:冰凍后的組織固定后免疫組化不表達為什么?
答:首先要確認該組織是否一定能表達某抗體,如果可以,那可能是冰凍組織塊處理存在問題。
Q:高壓抗原修復可以用堿修復液嗎?
答:可以。