達學堂·答疑討論
Q：特殊染色的時候會加陽性對照嗎？是怎么做的？
答：陽性對照是保證染色流程準確性及染色試劑有效性最好的方法。一般來說，陽性對照就兩種方法：①相同的染色每批次加一張相應的陽性對照；②染色時，待染切片旁加陽性對照（此種方法雖然耗費組織及染液，但能確保每張切片的準確性）。
Q：六胺銀染色片子上組織還沒有呈現黃色染液就變黑了，這時候應該怎么辦？要繼續染色？還是要更換染液再繼續染？
答：新配制使用的六胺銀染液呈清亮液體，作用時要控制好作用的溫度和時間（在58～60°C恒溫箱內作用20～60分鐘，至切片呈黃褐色，顯微鏡下觀察真菌呈黑褐色為適），染液很快就變成黑色（出現黑色銀鏡反應），可能是因為六胺銀染液混合配制時間過長、放入恒溫箱預熱時間過長或溫度過高等原因而造成，此時不能再繼續使用，應將切片取出，放置蒸餾水中浸泡，重新配制新的染液再進行染色。
Q：請問彈力纖維地衣紅染色，不是棕紅色，而是偏紅，對比不明顯，應該怎么糾正？
答：一般染彈力纖維不建議使用地衣紅染色，主要用醛品紅或維多利亞藍染色法。地衣紅雖然染液配制及染色流程都相對簡單。但染色的時間較長，陽性及對比度要稍微不如其他方法。地衣紅染彈性纖維呈棕紅色至深棕色，如偏紅，可能是染液使用過久、染色時間不足、分化不足及染液pH偏高等原因所造成，地衣紅染液pH一般在0.8-1.6之間著色都較好，當＞2，背景著色會加深，會造成背景分化不掉，對比度不清楚，可延長70%乙醇分化時間或用0.5～1%鹽酸乙醇適當分化，調整好對比度陽性就明顯了。
Q：抗酸染色脫蠟和透明用環保透明劑怎么去做？
答：目前市面上環保透明劑種類較多，各種主要成分不一定都一樣，使用前，用陽性對照片先來檢測一下，如果沒影響可以使用。
Q：巴氏染色中，橙黃G亮綠染的分別是完全角化細胞和角化前細胞胞質，為什么在六胺銀染色法中都可以使用呢？
答：橙黃G和亮綠兩種染液在宮頸細胞巴氏染色中，主要作用的細胞質，在EA/OG染液中，橙黃G和亮綠兩種染液是根據其分子量的大小著染不同的細胞質（同時進行）。在真菌六胺銀染色中，橙黃G或亮綠的作用都是一個性質和目的，用來復染背景，提高對比度，所以，只需要使用一種染液復染（淡染）即可。
Q：結核桿菌苯酚堿性品紅染色法時，脫蠟時是二甲苯和乙醇時間都會影響菌體染色嗎？染色后快速脫水透明是因為什么？
答：脫蠟至水經過二甲苯和乙醇時間長了，菌體中與苯酚堿性品紅結合的分枝菌酸（脂肪酸/脂類物質）容易被有機化合物溶解破壞了，染色就呈陰性了，所以染色前二甲苯和乙醇要快速。染色后快速乙醇脫水和二甲苯透明也是一個道理，乙醇脫水時間一長容易將苯酚堿性品紅與分枝菌酸結合形成的紅色復合物破壞。
Q：對于化療后反應的評估標準，不同的實體瘤是否相同？
答：不同的腫瘤是不一樣的，目前達成共識最多的是乳腺癌，乳腺癌也有七八種方式，但是總的原則基本一樣，就是三分法或五分法。不同的腫瘤，評估是不一樣的，是根據文獻來評估的。對臨床來說，完全是PCR或是接近PCR的，才是最有價值的。
