達學堂·答疑討論
Q：抗原修復時，什么時候該選擇酸性的修復液，什么時候該選擇堿性的修復液呢？ 有什么標準嗎？
答：沒有標準，每種新使用的抗體均應進行驗證。當然試劑說明書會有推薦的修復液，可參考。
Q：如何消除背景色，減少背景染色呢？
答：產生背景非特異染色的原因很多，有組織處理質量差、一抗濃度過濃、抗體孵育時間長或抗體質量差等不同原因所致非特異染色，應針對不同原因進行處理。
Q：如果是外院會診很久之前的蠟塊要怎么選著操作方案呢？
答：若年限超過5年，抗原修復時間及抗體孵育時間均要延長，一抗的稀釋度可能也要適當降低（即一抗要濃一些），手工及儀器檢測條件不同。比如某一抗體常規檢測是Ventana MCC1 ，一抗30min/37℃ 年限較長的庫存蠟塊，可能要用到 SCC1，一抗60min/37℃。這是舉例，具體的要測試和驗證。
Q：高壓鍋修復時，修復液直接加在高壓鍋里，還是裝在染色缸里用水浴加熱加壓？
答：兩種都可以，但修復時間不一樣。若將修復液直接倒在高壓鍋內，高壓鍋噴氣閥噴氣后計時3-5min;隔水高壓，時間可延長，具體多少分鐘合適？不同抗體、不同檢測試劑盒會稍有區別，要測試。
Q：請問如何解決溫度低，導致免疫組化表達率低的問題。
答：·手工檢測：若樣本量不大，建議用25℃或37℃水浴箱恒溫孵育抗體；
·儀器檢測：通過空調調整溫度。
Q：如果用苦味酸固定，還需要抗原修復嗎？如果需要，那么相比甲醛修復時間要更長還是更短？
答：這位老師所指的是單純的固味酸作為固定液？還是含有苦味酸的固定液？若固定液中含甲 醛，就應該行抗原修復。
Q：手工修復抗原注意事項呢？
答：微波修復：（1）確保抗原修復時維持溫度為99-100℃，維持時間20-25min（計時是從修復液沸騰后開始計時），為確保修復溫度，不建議用大容器盛裝修復液進行抗原修復；（2）確保組織在修復過程中必須浸泡在修復液中，必在時修復中途應添加修復液；（3）正式用于臨床診斷前，先進行修復條件驗證；
高壓修復：（1）嚴格控制抗原修復時間，防止過度修復；（2）計時是從高壓鍋的壓力閥開始噴氣才進始計時，一般3-5分鐘；（3）高壓修復加溫時間結束后，應立即降壓，打開鍋蓋后室溫冷卻。
