達(dá)學(xué)堂·答疑討論
Q：解凍，我們用的膠水，怎么解凍呢？
答：沒用過。可用實(shí)驗(yàn)組織塊嘗試跟OCT包埋劑的解凍方式進(jìn)行解凍，了解組織處理質(zhì)量。
Q：背景著色屬于非特異性著色嗎？
答：是的。非特異著色是指在非預(yù)期的著色部位出現(xiàn)了染色，引起非特異染色的常見原因有：（1）組織固定不及時(shí)，抗原彌散，導(dǎo)致定位不清；（2）抗體濃度過濃，不該著染的成分出現(xiàn)染色：（3）抗體孵育時(shí)間過長；或抗原修復(fù)時(shí)間過長，導(dǎo)致非特異染色；（4）抗體質(zhì)量欠佳，特異性差，導(dǎo)致所有組織均著染；（5）PBS漂洗時(shí)間過短。
Q：pAX5做了怎樣的處理？
答：講義上講的：延長了抗原修復(fù)時(shí)間及抗體孵育時(shí)間。
Q：請教一下做出來的片子出現(xiàn)完全未染上色的情況 你們是怎么處理的？
答：首先查找白片發(fā)生的原因，在確保組織處理質(zhì)量的前提下，著重檢查檢測過程是否存在不足，如果是手工染色：檢查有沒遺漏操作步驟；抗原修復(fù)是否達(dá)到要求？修復(fù)液是否配錯？有沒有加錯抗體（尤其是沒有內(nèi)對照及外對照的情況下）；如果是機(jī)器全自動檢測：確認(rèn)抗體試劑量是否充足？緩沖液配置是否有問題？若單位內(nèi)部組織處理經(jīng)常存在問題，則先了解樣本處理環(huán)節(jié)是否存在問題？
Q：細(xì)胞涂片檢測免疫組化怎么修復(fù)比較合適？
答：細(xì)胞涂片若用酒清固定可以不用抗原修復(fù)，若需抗原修復(fù)可選用溫和一點(diǎn)的修復(fù)方式，如水浴。
Q：OTC膠會不會對組織脫水有影響？
答：OCT包埋劑溶于水，冰凍組織塊應(yīng)單獨(dú)用一個裝有固定液的盆溶解組織上的OCT包埋膠，然后再轉(zhuǎn)移到無包埋膠的固定液中。
Q：請問如何做每張切片的陰陽對照呢？
答：每種抗體均有特定的表達(dá)譜，取該抗體陽性表達(dá)的組織做陽性外對照，不表達(dá)的組織做陰性對照，將陽性及陰性組織包在同一蠟塊上，只要檢測這種抗體，同一切片上撈上陽陰性對照組織。
