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達(dá)學(xué)堂·答疑討論

Q:請問老師固定液配方?

答:10%中性福爾馬林配方:磷酸氫二鈉 6.5g ,磷酸二氫鈉4g,40%濃甲醛100ml,蒸餾水定量至1000ml,調(diào)PH值至7.2。

Q:想請老師講一講手工操作的相關(guān)問題和改善措施。

答:這個問題太泛,每個環(huán)節(jié)均可出現(xiàn)問題,你可以將你工作中遇到的問題整理一下,拿出來一起討論。

Q:我們現(xiàn)在每周兩次免疫組化,每次30張片左右,我們是手工做,PBS沖洗后加抗體那一步花的時間比較多,抗體孵育時間按最后一張玻片滴加時間算起的話,前面的就相對孵育時間過長,請問如何快速除去PBS加快滴加抗體的速度?

答:如果加樣速度較慢,每10張片算一個時間,減少第一張片與最后一張片的時間差,盡量保證抗體孵育時間一致。加強(qiáng)練習(xí),技術(shù)熟練了自然會快。

Q:我們的組化機(jī)器,上周做的一張AR的組化片,對照選的同一患者的三粒前列腺組織,結(jié)果在同一張玻片上,兩邊的前列腺顯示陽性,中間的前列腺組織顯示陰性,這是什么原因呢?

答:首先要確認(rèn)三粒組織是否全為陽性染色的組織?

Q:關(guān)于免疫組化儀,因為玻片質(zhì)量問題所導(dǎo)致的氣泡問題,麻煩老師再講一遍。我們在切片烤片上的要求有規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)嗎?多厚烤片多久?我們之前出現(xiàn)過大量氣泡,一直以為是烤片沒考好。

答:講義上給大家展示的是在Ventana平臺檢測時,若玻片疏水性比較明顯,容易產(chǎn)生講義上展示的“氣泡現(xiàn)象”。切片厚度應(yīng)根據(jù)細(xì)胞的密集程度來定,若為淋巴造血組織,細(xì)胞密度較高,應(yīng)薄切(約2um),若細(xì)胞密度不大,切片厚度4um??酒?0℃烤60min。

Q:一般儀器多久關(guān)一次開關(guān)?我們每天至少上三輪,有時候上四輪,幾乎不關(guān)機(jī)!除非有問題請工程師來的時候才有可能關(guān)閉開關(guān)。

答:日常工作無法關(guān)機(jī)的情況下,建議每周關(guān)一次機(jī)。

Q:脫鈣液會影響免疫組化的結(jié)果嗎?如果有,如何避免此問題?

答:無機(jī)酸類試劑處理組織后,若組織內(nèi)的酸未充分清除干凈,會影響HE染色及免疫組化染色,脫鈣后的組織,要用70%酒精浸泡2-3小時,間中換2-3次酒精,將組織內(nèi)的酸完全置換出來,以保證后續(xù)HE染色及免疫組化檢測

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