達學堂·答疑討論
Q:請問固定液PH值應該是多少?
答:7.2
Q:抗原修復完后,二甲苯除去浮蠟的建議?
答:抗原修復后不建議再用二甲苯除浮蠟,因二甲苯處理切片后又得經梯度酒精至水,改變了抗原修復后切片所處的緩沖系統,可能會對免疫組化檢測帶來不良影響。
Q:等到免疫組化筆干燥,再泡到PBS試劑中。但是會存在片子可能也干了,或者組織區域干燥的風險,如何把控?
答:切片從PBS取出后,用紙巾擦干組織兩側的水份,然后畫線,不能擦干組織表面的水份,這樣是不會干片,玻片上免疫組化筆畫的畫線很容易干燥(即玻片上的畫線不是濕漉漉的即可)
Q:請問每次肌上皮染色效果不好是怎么回事呢?是按照正常流程來的。
答:肌上皮的標記物有幾種,請問是哪個標志物標記效果不好?麻煩你將你所使用的肌上皮標志物及你的檢測流程一起提供(有照片最好),這樣才能正確分析問題出在哪?
Q:冰凍做免疫組化有價值嗎?
答:如果某些抗體只能用于新鮮組織冰凍切片進行免疫組化檢測,或者某些病例在手術臺上需依賴免疫組化協助診斷,再確定手術方案,就很有價值。
Q:冰凍組織做免疫組化,建議抗體孵育時間要怎么掌控?
答:指的是新鮮組織冰凍切片做免疫組化嗎?不同品牌一抗,不同檢測試劑盒抗體孵育時間會有差異,應根據自己實驗的實際條件,測試各種抗體的稀釋度及抗體孵育時間。沒有特殊要求情況下,如果能用石蠟切片進行免疫組化檢測,不建議使用冰凍切片進行免疫組化檢測(除外特殊要求)。
Q:那冰凍恰當的解凍方法應該是怎么解凍?
答:做完冰凍的組織塊取出后,將樣本托放在掌心捂一捂,用鑷子迅速分離OCT包裹的組織與樣本托,隨后將樣本切面朝下放入包埋盒內,蓋好盒蓋,立即將冰凍組織塊放入10%福爾馬林液中固定。切忌將冰凍組織塊放在水籠頭流水沖洗或待OCT包埋膠融化后才夾起組織放到固定液。