達(dá)學(xué)堂·答疑討論
Q：特殊染色的時(shí)候會(huì)加陽性對(duì)照嗎？是怎么做的？
答：陽性對(duì)照是保證染色流程準(zhǔn)確性及染色試劑有效性最好的方法。一般來說，陽性對(duì)照就兩種方法：①相同的染色每批次加一張相應(yīng)的陽性對(duì)照；②染色時(shí)，待染切片旁加陽性對(duì)照（此種方法雖然耗費(fèi)組織及染液，但能確保每張切片的準(zhǔn)確性）。
Q：六胺銀染色片子上組織還沒有呈現(xiàn)黃色染液就變黑了，這時(shí)候應(yīng)該怎么辦？要繼續(xù)染色？還是要更換染液再繼續(xù)染？
答：新配制使用的六胺銀染液呈清亮液體，作用時(shí)要控制好作用的溫度和時(shí)間（在58～60°C恒溫箱內(nèi)作用20～60分鐘，至切片呈黃褐色，顯微鏡下觀察真菌呈黑褐色為適），染液很快就變成黑色（出現(xiàn)黑色銀鏡反應(yīng)），可能是因?yàn)榱枫y染液混合配制時(shí)間過長(zhǎng)、放入恒溫箱預(yù)熱時(shí)間過長(zhǎng)或溫度過高等原因而造成，此時(shí)不能再繼續(xù)使用，應(yīng)將切片取出，放置蒸餾水中浸泡，重新配制新的染液再進(jìn)行染色。
Q：請(qǐng)問彈力纖維地衣紅染色，不是棕紅色，而是偏紅，對(duì)比不明顯，應(yīng)該怎么糾正？
答：一般染彈力纖維不建議使用地衣紅染色，主要用醛品紅或維多利亞藍(lán)染色法。地衣紅雖然染液配制及染色流程都相對(duì)簡(jiǎn)單。但染色的時(shí)間較長(zhǎng)，陽性及對(duì)比度要稍微不如其他方法。地衣紅染彈性纖維呈棕紅色至深棕色，如偏紅，可能是染液使用過久、染色時(shí)間不足、分化不足及染液pH偏高等原因所造成，地衣紅染液pH一般在0.8-1.6之間著色都較好，當(dāng)＞2，背景著色會(huì)加深，會(huì)造成背景分化不掉，對(duì)比度不清楚，可延長(zhǎng)70%乙醇分化時(shí)間或用0.5～1%鹽酸乙醇適當(dāng)分化，調(diào)整好對(duì)比度陽性就明顯了。
Q：抗酸染色脫蠟和透明用環(huán)保透明劑怎么去做？
答：目前市面上環(huán)保透明劑種類較多，各種主要成分不一定都一樣，使用前，用陽性對(duì)照片先來檢測(cè)一下，如果沒影響可以使用。
Q：巴氏染色中，橙黃G亮綠染的分別是完全角化細(xì)胞和角化前細(xì)胞胞質(zhì)，為什么在六胺銀染色法中都可以使用呢？
答：橙黃G和亮綠兩種染液在宮頸細(xì)胞巴氏染色中，主要作用的細(xì)胞質(zhì)，在EA/OG染液中，橙黃G和亮綠兩種染液是根據(jù)其分子量的大小著染不同的細(xì)胞質(zhì)（同時(shí)進(jìn)行）。在真菌六胺銀染色中，橙黃G或亮綠的作用都是一個(gè)性質(zhì)和目的，用來復(fù)染背景，提高對(duì)比度，所以，只需要使用一種染液復(fù)染（淡染）即可。
Q：結(jié)核桿菌苯酚堿性品紅染色法時(shí)，脫蠟時(shí)是二甲苯和乙醇時(shí)間都會(huì)影響菌體染色嗎？染色后快速脫水透明是因?yàn)槭裁矗?/span>
答：脫蠟至水經(jīng)過二甲苯和乙醇時(shí)間長(zhǎng)了，菌體中與苯酚堿性品紅結(jié)合的分枝菌酸（脂肪酸/脂類物質(zhì)）容易被有機(jī)化合物溶解破壞了，染色就呈陰性了，所以染色前二甲苯和乙醇要快速。染色后快速乙醇脫水和二甲苯透明也是一個(gè)道理，乙醇脫水時(shí)間一長(zhǎng)容易將苯酚堿性品紅與分枝菌酸結(jié)合形成的紅色復(fù)合物破壞。
Q：對(duì)于化療后反應(yīng)的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，不同的實(shí)體瘤是否相同？
答：不同的腫瘤是不一樣的，目前達(dá)成共識(shí)最多的是乳腺癌，乳腺癌也有七八種方式，但是總的原則基本一樣，就是三分法或五分法。不同的腫瘤，評(píng)估是不一樣的，是根據(jù)文獻(xiàn)來評(píng)估的。對(duì)臨床來說，完全是PCR或是接近PCR的，才是最有價(jià)值的。
