達學堂·答疑討論
Q：脫水程序完成后，蠟浸泡在脫水機里，組織在蠟缸里一兩個小時會有影響嗎？
答：沒有影響，哪怕浸過夜也沒有影響。為了使組織對基因重排沒有影響，我們 一般周五取材，周五晚上脫水，周六早晨就把組織浸在蠟里面，一直到下周一再 來包埋，是沒有問題的。
Q：胃腸大標本切片時，為什么肌肉層更容易出現空洞？
答：在切的時候，每一層的硬度是不一樣的，當蠟浸得越充分的時候，切片的時候黏性大，切片的時候不太容易出現空洞?？斩丛趺磥淼模靠斩淳褪窃谛奁臅r候，蠟的黏度性下降，組織整塊掉下來了，所以容易出現空洞，這個時候多細修一下，空洞很快就沒有了。
Q：福爾馬林色素如何處理掉？
答：堿性酒精。80%酒精100ml加1%氫氧化鉀1ml，把片子泡在堿性酒精里面，就可以把色素去掉。其實很少 能看到福爾馬林色素。
Q：夏天的時候切片容易產生一層水霧是怎么回事？
答：有的時候潮濕，脫水不是很好的情況下，組織里的水很容易進去。
Q：并不是每塊組織都需要脫脂，無水酒精加二甲苯會影響脫水效果嗎？
答：不會的。脫水時間夠的情況下，二甲苯對組織沒有任何影響。
擴展
? 二甲苯時間長了，組織會發硬發脆，這個理論是錯誤的。
我試過在二甲苯下面透明過夜，組織非常好切，根本就不會出現發硬發脆。我也曾經試過二甲苯在 62 度的溫度下過夜，也沒有發現發硬發脆。
? 二甲苯是在什么情況下會造成組織發硬發脆 ？
其實二甲苯只有在浸蠟過程中才會造成組織發硬發脆，即：組織發硬發脆都是在浸蠟過 程中引起的。原因如下：
（1）二甲苯有一個特點：當溫度升高的時候，它可使水析出。如同南方在潮濕的時候，染完的片子從酒精里出來，倒了二甲苯馬上發渾，這個渾說明很多水進去了。這時只需把二甲苯放到溫箱里面半小時，水就沉在了二甲苯的底部，二甲苯就會變清，高溫會使二甲苯的水析出來。
（2）當溫度升高的時候，二甲苯可使水析出，同時如果組織脫水不徹底，則在浸蠟的過程中，二甲苯就會把水析出來。由于水和蠟不相溶，在水析出來的過程中，水把石蠟擋在了組織的外面。而蠟的特點是蠟會緊緊地把這個組織包住，組織內溫度迅速升高，導致組織里面沒有蠟的情況下，組織干烤，就會發硬。所以組織發硬就是在脫水不充分的情況下產生的因此，當切片不好切時，我們一定要考慮浸蠟的因素，會不會蠟里的二甲苯帶過去太多了。
Q：當天下午3點取材，送來的標本也接著取，基本上沒做大標本剖開固定，類似情況免疫組化是否可靠？
答：免疫組化固定不好的話，結果是有問題的。我做過好像有些抗原會丟失，有些抗原也有增強的現象，似乎對免疫組化會有影響，所以還是要固定充分的。
Q：如果選擇環保固定液，對后期免疫組化分子會不會有影響?
答：環保固定液用的是用醇性固定液會有略微影響，但是對分子不會有影響。
