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達學堂·答疑討論

Q:冷凍切片,樣本角度調節是否有必要?樣本頭角度能否調節?

答:這個問題在裝機的時候是要解決的,樣本角度肯定是要調的。我們這邊以前還用過大刀片,20cm長的那種鋼刀,它的角度有的切片機是0度,有的是5度,還有的是10度,這個角度不是死的,因為我們買的切片刀的角度是不一樣的,要根據不同的刀片推薦的角度來進行調整。一般通用的就是5度左右,如果切片不好可以來回調,這個不是固定的。值得注意的是,冷凍切片機的鋼材屬于特種鋼,熱脹冷縮現象明顯,在常溫下,去轉動冰凍切片機手柄,阻力很大或根本搖不動,因為常溫下鋼材膨脹了,只有到-20°C以后,整體溫度降下去,切片的時候才會很順暢,很省力。關于樣本頭角度問題,在買切片機的時候,要注意機器有標配、有選配,如果沒有樣本頭調節角度的那個配件,那就調不了,角度大概是15至18度,要選配了才可以調。

Q:冰凍機的樣本頭制冷在平時工作中用處大不大?機箱溫度跟樣本頭差距有多大?

答:樣本頭制冷常見于雙壓縮機,并不是說單壓縮機不行,只是雙壓縮機的提供了另外一層保障,特別是我們在做脂肪切片的時候,樣本頭是要開啟制冷的。平常切片的時候,冷凍切片機設置的工作區溫度就是-20°C至-25°C,但是特別像甲狀腺、肝臟、腎臟、淋巴結、帶血塊的組織,我們不能設置溫度低于-20°C,-15°C左右就行了。如果切片機可以把樣本頭和刀座分開來設置溫度最好,雖然可以簡單的同時設置到-20°C至-25°C,但是一般來講,刀座(刀片)溫度應該比樣本頭低5-10°C。選購冰凍切片機的時候,建議大家選帶半導體制冷的,這樣可以把冷錘很快降到合適的溫度。還有一點,如果是單壓縮機,且功率較小,可以用專門的速凍儀凍好后再拿到冰凍切片機里切片。嚴格來講,機箱溫度(冷凍艙溫度)就是樣本頭溫度,對于單壓縮機機型來說更是如此。

Q:切片機上石蠟,用什么來清理,夾頭彈簧經常不靈,怎樣處理?

答:關于石蠟呢,最先強調是每天都做清理,用毛刷都很好地可以刷掉。對于頑固的蠟屑一般最簡單的方法就是用加熱法。因刀座的材質很特殊,硬度不大,平常有很頑固的石蠟或組織碎屑什么的不建議用金屬器具強力鏟除!我們是用吹風機來吹,等到蠟屑融化了以后把它擦干凈就可以了。如果不想用吹風機的話,可以把整個刀座拆下來,放在烤箱里面,65度左右烤一兩個小時,石蠟就會自動流出來,拿出來再擦干凈。國內有一些廠家有專門清理石蠟的試劑可以買,不過平時的清理還是最重要的。

Q:冰凍切片冰晶多的原因都有哪些?

答:冰晶是不可能杜絕的,因為冰凍切片的過程,事實上就是冰晶形成的過程,現在要減少冰晶,是減少胞外冰晶,這個胞外冰晶的減少,有這么幾點可以注意。第一,標本要盡量不含水,特別是一些含有黏液、體液這些東西,還有像含水豐富的組織像腦組織、乳腺等,我們可以用吸水紙將表面的水吸干一些,這樣可以很大范圍地減少冰晶。第二,要注意冷凍的時機,平常做冷凍切片的時候,不同操作者有不同的習慣。有人一邊打膠的同時將組織放上去;有人是等樣本座上面的膠凍到快凝固的時候,再放組織;還有人直接將組織放在樣本座上面,我們推薦采用第二種方法。其實冰晶的形成是一個倒金字塔的形狀,最開始和冷凍錘相接觸的部位,冰晶是最少的,越往下來,越深的部位冰晶就越多,所以這就要求冷錘足夠冷。冷錘理想的溫度是-40°C以下,如果冷錘的溫度達不到,因為長時間地將冷錘壓在組織上面,冰晶就會形成更多。緩慢、低效率地冷凍,就是冰晶形成最關鍵的要素。

Q:速凍冰凍切片機哪款設備好?

答:具體品牌不方便講,以免廣告嫌疑。首先推薦買雙壓縮機的,然后必須要有帕爾貼半導體制冷,因為只有借助半導體制冷才能快速降到-45°C以下。但也有例外,有一款單壓縮機冰凍切片機因設計了冷鹽水循環致冷,效果很好。但要注意定時檢查鹽水儲存情況,以免燒毀鹽水泵。

Q:我想請問下單壓縮機的冰凍切片機,上次我們科室下午來了同時來了近二十個部位的組織快速切片,我們在做到十三四個的時候出現了速凍臺升溫情況,基本不能凍(在這期間我們速凍按鈕一直開著的,大概有二十多分鐘)我想問問是哪里出現問題,還有就是這情況怎么可以避免嗎?帕爾貼會不會持續使用出現升溫狀態呢?我試了,可以在時間范圍內降到負28度。

答:這種現象很常見,特別像是在南方溫度高的時候,有些切片機對環境的要求比較高,要求在切片房裝空調,常年維持室溫在25°C-28°C,使壓縮機的壽命更長。長時間做切片,倉門頻繁打開,外面的空氣比較熱,造成溫度上升是很正常的現象。如果有大量冷凍標本的時候,用冰凍切片機時要注意及時關閉艙門,切片時盡量讓艙門關閉,盡量減少打開艙門的操作。帕爾貼指的是半導體制冷,理論上可以使局部溫度下降到-50°C、-60°C,關于半導體制冷功能,大多數切片機限定了每一次工作時間,最多就10分鐘,10分鐘以后你還可以開啟。還有一點帕爾貼如果無節制的使用,很快就會燒毀。半導體制冷成本很低,但半導體PN結的結構局限使得功率不可能做到很大,也不可能長時間工作(散熱問題難以解決)。在有很多冰凍切片的時候,速凍是必須要開的,但要注意隨開隨關。如果確實是因為溫度上升不能做了,也沒辦法,只能等溫度降下來后再繼續做,甚至如冷凝管結霜嚴重還必須化霜后才能繼續工作。其實,這種情況的出現主要還是冰凍切片機壓縮機功率太小了所致。有時候也許機器顯示的溫度還有-20°C左右,但就是無法順利切片。這是因為冰凍切片機的溫度傳感器一般都安裝在冷凍艙深部位置,與速凍臺和樣本頭還有一定的距離。所以,我們建議冰凍切片量大的醫院最好能配備兩臺冰凍切片機,輪流使用,就可以避免無法制片的尷尬。另外,在這種極端情況下,可能會出現一個超時的問題。很多冰凍切片標本扎堆送檢,(特別是三甲醫院要求單標本制片時限是10分鐘),多個標本也要求10分鐘做完是不可能的。之前國家衛健委病理質量控制中心開會討論過這個問題,如果出現標本多的情況,要從臨床上找問題,因為這樣送檢標本與冰凍切片的初衷是不符合的。

Q:切片的時候切片機每個活動的地方丟擰緊了還是會跳片是因為什么呢,是機子哪里需要調一下嗎?

答:跳片的話我們首先從切片機本身來找原因,第一,有一種刀片只適合做冰凍切片,如果做石蠟切片的話就很容易跳片。因為每個活動的在方都擰緊了,我們先確定是不是切片刀的問題。第二,看看是否是組織本身的原因,有些硬的組織,無法正常切片,機器不進刀,容易退刀,這個時候我們試試把刀座拆下來,再裝回去,把各緊固部件都擰緊以后,如果還有問題,我們就換刀片,或是換一個品牌的刀片。平常買刀片的時候,要注意用于石蠟切片的刀片,除了注意品牌之外,最關鍵的是要注意刀片的硬度。如果當天所有蠟塊都有“跳刀”現象,那就還有一種可能性就是脫水機試劑要徹底檢查更換了;如果試劑沒問題那就要仔細檢查脫水機是否出問題了!
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