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達學堂·答疑討論

Q:小組織懷疑癌,腺瘤,一有問題的片子一切,顯微鏡下看都是裂紋、刀口,是為什么?

答:腺瘤本身細胞特別豐富,確實容易切碎,可能是脫水脫得有點過。最好是大小標本分開脫水,小標本脫水的時間要設置得比較短一點,另外切片的時候可以浸泡一下冰水。

如果蠟塊總體偏脆的話也可以換熔點稍低的高質量石蠟,最好是顆粒蠟。

Q:封片是選擇干封還是濕封?

答:選擇濕封。干封和濕封的效果差別還是挺大的,有條件的話還是要選擇濕封,注意改善通風換氣條件,保護自身健康。

Q:水溶性伊紅染色第一天特別紅,但衰減特別快,第三天和第一天染出來效果差別很大。

答:水溶性伊紅的染色力相對差一點,容易出現衰減,我們是通過調節染色時間、水洗時間以及適當補充冰醋酸來維持穩定。

還有就是要注意染液的量和片子數量的關系,染液少、片子多肯定消耗大。

進入伊紅前要盡量瀝干水分,否則每次染色都帶較多水分的話,伊紅很快就稀釋了,當然染色力下降。

Q:淋巴結染色容易脫片,容易有裂紋,可能是什么原因呢?

答:可能是固定不好。因為淋巴結有一層包膜,很致密,固定液很難滲進去,固定不好很容易脫片。

另外,玻片要清潔,烤片時間和溫度要足夠,建議65-70℃×30min以上,玻片要立起來烤片,防止玻片和組織之間有水分。

淋巴結是個細胞很豐富的組織,在切片的時候是很容易出現裂紋的,可以用冰水浸泡的方法,粗修以后在冰水中浸泡1分鐘以上,再換新刀勻速輕柔地切片,這樣會比較好。當然前提還是脫水、固定這些前處理要做得好。

Q:片子總是發灰,怎么解決?

答:一個可能是封片的時候沒有濕封,要做一下對比。還有一個可能是在封片前最后一缸無水酒精含有比較多的水分,比較潮濕。當然,蘇木素和伊紅如果顏色不鮮艷的話,看起來也會灰灰的。

Q:HE染色過藍,怎么重染?

答:一般我們是比較喜歡染色能力強的染料,因為比較擔心染不上色。過藍的話,一是縮短染色時間、二是加強分化的程度,從這兩方面進行調整就可以。如果染好的片子過藍,建議重新切一張重新染色。過程中要摸索它的染色條件,熟悉片子的染色變化,根據具體情況調節染色時間。也可以每天正式染色前先試染兩三張片子摸摸條件。

Q:冰凍蘇木素不上色是什么原因?

答:首先要分析一下用的是什么蘇木素、蘇木素成不成熟、染色時間夠不夠,還有固定的情況,如果固定不好的話,也是不容易上色的。

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