達(dá)學(xué)堂·答疑討論
Q:福爾馬林固定用多少量呢,和胸水比例是多少?
答:新冠疫情期間細(xì)胞學(xué)標(biāo)本首選經(jīng)福爾馬林固定后4-6小時(shí)后制成細(xì)胞蠟塊。我們實(shí)驗(yàn)按照細(xì)胞學(xué)標(biāo)本:100%福爾馬林原液體積比為10∶1的比例加入100%福爾馬林固定液,混勻后(此時(shí),細(xì)胞學(xué)標(biāo)本中福爾馬林濃度約為10%)固定4~6 h后再離心。
Q:冷丙酮起固定和硬化的作用吧?
答:冷丙酮的作用就是固定硬化成塊。
Q:請(qǐng)問(wèn)血性胸腹水破紅的方法,和試劑的配比是怎樣的?
答:末次離心時(shí)加入PBS緩沖液進(jìn)行稀釋?zhuān)猎?0 ml液基保存液/冰醋酸→去除紅細(xì)胞黏液等相關(guān)背景→離心沉淀。
Q:請(qǐng)問(wèn)丙酮在哪里購(gòu)買(mǎi)的,丙酮揮發(fā)怎樣解決?我們這里公安局會(huì)定期來(lái)檢查,用丙酮很不方便。
答:我們將丙酮放至4度冰箱冷藏,雙層瓶蓋封好的情況下一般揮發(fā)還好。
Q:請(qǐng)問(wèn)冷丙酮在細(xì)胞蠟塊制作中的作用及原理是什么?
答:冷丙酮在細(xì)胞蠟塊制作中的作用是固定成塊,丙酮的固定的原理是使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝固,終止或抑制細(xì)胞內(nèi)酶促反應(yīng),防止細(xì)胞自溶,以保持組織固有的形態(tài)結(jié)構(gòu),更重要的是保持細(xì)胞的抗原性。
Q:如果患者有不明原因的胸腔或腹腔積液,可以檢測(cè)出其中是否含有癌細(xì)胞?
答:首先在收到胸腹水標(biāo)本之后先制作出細(xì)胞蠟塊,在鏡下先看是否有癌細(xì)胞,如果有,會(huì)進(jìn)行免疫組化來(lái)進(jìn)行確診。如果用細(xì)胞涂片,是可以判斷出有癌細(xì)胞,但是不能看出癌細(xì)胞的來(lái)源。而制作細(xì)胞蠟塊的話是可以明確診斷癌細(xì)胞的來(lái)源。
Q:冷丙酮一定要是冷的嗎?常溫保存的丙酮能直接用來(lái)制作蠟塊么?
答:一般丙酮放在4℃冰箱保存,因?yàn)槔浔梢詼p少細(xì)胞的腫脹,所以一般用冷丙酮。不過(guò)常溫保存的丙酮應(yīng)該也是可以的,可以去用實(shí)驗(yàn)比較一下兩者之間的區(qū)別。